肉的宰后嫩化比较重要归因于肌原食物弹性纤维棉节构的受损，肌原食物弹性纤维棉节构是由内源性球淀粉酶电离体现酶溶解塑料肌原食物弹性纤维棉和癌血内部骨架球淀粉酶造的。与更多的年来一只是了解亮点的钙球淀粉酶酶不相同，胱天球淀粉酶酶（caspases）较近为感动手作用搞笑的话题。胱天球淀粉酶酶在癌血内部凋亡的履行的阶段起着至关比较重要的用处，其中的caspase-3在去逝球淀粉酶电离体现中的用处是多多面和繁复的，为此必玩进步浅议。S-亚硝基化在调结钙移除、卡路里基础代谢、球淀粉酶质溶解塑料和癌血内部凋亡来调结吃起来，涉及到嫩度和持水作用。品牌的校园营销推广活动在初期浅议察觉到S-亚硝基化也可以再降依赖感线粒体的caspase-3级联体现，这可能性是肌群癌血内部凋亡和牛羊肉品行变化无常的根本原因。caspase-3的浅议重大是其与癌血内部凋亡的的联系，虽然，比较少的有浅议浅议S-亚硝基化调结caspase-3的机理。

2024年9月由苏州现代农业大专张万刚讲解团队图片在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱动物为该研究提供了亚硝基化掩盖组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

英文版题头：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

刊物：Journal of Agricultural and Food Chemistry

202多年直接影响成分：5.7

提出日子：2024年9月

的客户政府部门：南京农业大学

调查产品：蛋白

拜谱出示技术应用：亚硝基化修饰组学

技木路线图：

一、探索但是

01.Caspase-3活力性

当今尚不非常清楚NO对caspase-3的遏生产制使用是归因于NO介导的S-亚硝基化，不一样浓度值梯度方向的GSNO身为外源性NO供应信息，以诱发caspase-3的身体S-亚硝基化。最终结果是因为，与没了GSNO的组相对于，100、200和400μM GSNO组的caspase-3活性氧酶强势削减（图1），与之前了解共同。GSNO清理削减caspase-3活性氧酶的潜在性诱因仍存在不足展现。

图1 与众不同有机废气浓度的GSNO进行处理对caspase-3抗逆性的的影响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化数量

科学设计Caspase-3的亚硝基化水平，以相不一样GSNO对Caspase-3的反响性。经GSNO清理后，在线在线检测到caspase-3蛋白酶S-亚硝基化硬度添加（图2）。这类报告发现，外源性GSNO培育可成就 帮助caspase-3的体内S-亚硝基化。真令人咋舌的是，在并没有GSNO有着的比对组中在线在线检测到一款 暗淡的S-亚硝基化带，这发现caspase-3可能性引发内源性的S-亚硝基化。不仅，本科学设计中caspase-3的S-亚硝基化水平较高，而caspase-3的活力性减低，这与过后的科学设计不一样。但，caspase-3的活性朋友S-亚硝基化遮盖位点尚不清析，还要进步的找寻。

图2 GSNO治理 对caspase-3S-亚硝基化水平方向的引响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化遮盖组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的队列。蓝色的符号的队列认为S-亚硝基化肽，蓝色符号的C认为S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3降解塑料结蛋清

结蛋清酶酶酶做为属于关键性的血细胞系骨架蛋清酶酶酶，在达到肌血细胞系型式的型式完善版性和收縮性上起着关键性用途，探讨S-亚硝基化caspase-3对结蛋清酶酶酶可可降解的太渗透性的有着关键性意义上。与Std（未用胱天蛋清酶酶酶酶-3和GSNO孵育的原始肌化学人造纤维蛋清酶酶酶）组对比，0 μM GSNO组（肌原化学人造纤维和caspase-3的孵育，无GSNO）的完善版结蛋清酶酶酶硫分量强势减小，提醒caspase-3对结蛋清酶酶酶有着内在的的蛋清酶酶酶油脂水解业务能力。在GSNO孵育后，完善版结蛋清酶酶酶的硫分量明显的延长（P < 0.05）。前者，当GSNO氨水浓度增加时，完善版结蛋清酶酶酶的硫分量连续调涨（P < 0.05）（图5）。上述感觉反映，SNO掩盖的caspase-3以情况依耐的模式抑制作用结蛋清酶酶酶的可可降解。

图5.S-亚硝基化caspase-3降解塑料结蛋白质

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3生物降解肌钙蛋清-T

肌钙淀粉酶-T (TnT)是原肌球淀粉酶调准主要负责健身肌肉收缩毛孔的丝条的必备肌原棉合成化学纤维淀粉酶。TnT的可化学吸附特点是检验到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化具体条件下，caspase-3对TnT的可化学吸附实际情况如下图6下图，与Std组（包涵caspase-3和GSNO的肌原棉合成化学纤维）相对来说，caspase-3组中30 kDa TnT细节描写相关性增添，意味着caspase-3参与者了TnT的可化学吸附，除此之外，caspase-3与GSNO的孵育出现30 kDa TnT下跌。在100和200 μM GSNO组之間不会检验到很明显的对比分析(P > 0.05)，而当GSNO的浓度值达到了400 μM 时，该细节描写相关性才能减少(P < 0.05)。这种出现 意味着了SNO突显的caspase-3对TnT可化学吸附的调控功能。结淀粉酶和TnT是caspase-3的铭感底物，而GSNO进行处理减低caspase-3的生物能够出现肌原棉合成化学纤维淀粉酶可化学吸附层度减低。笔者认为所说，NO诱导型的S-亚硝基化可能凭借突显半胱氨酸残基来调准caspase-3的生物，而使进一大步后果其对结淀粉酶和TnT的淀粉酶淀粉水解能力素质，为了后果牛肉片品行。

图6. S-亚硝基化caspase- 3降解塑料肌钙蛋白质-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、工作小结

本理论研究指在论述S-亚硝基化对caspase-3绘制的损害举例随后不久对牛羊肉肌原化学植物纤维身体外可降解的损害。蛋清S-亚硝基化能绘制caspase-3的半胱氨酸残基，为了导至caspase-3几丁质酶降低，进第一步控制了其对牛羊肉肌原化学植物纤维蛋清的蛋清淀粉水解业务能力。

三、拜谱总结ppt

探讨用了酶活检验，亚硝基化淡化组学探讨，WB等检验方式方法，知道核血清质S-亚硝基化就能够淡化caspase-3的半胱氨酸残基，这促使了caspase-3催化活性的减低，并举这一步能够抑制了其对鸡肉肌原弹性纤维核血清质的核血清质油脂水解力。本探讨为解说核血清质质亚硝基化对吃起来的政策调控策略提供了一个多个新的视野。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的蛋清质组学、体现蛋清质组学、分解代谢组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系列拜谱生物厂品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺硝化作用、total防氧化抹除、游离于巯基，欢迎大家咨询！

考虑学术论文：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663